Het kweken van de Psilocybe cubensis op een substraat van stro is de beste keuze als je van plan bent op een wat grotere schaal te gaan kweken. Stro geeft een betere voedingsbodem. De paddestoelen op stro worden daardoor groter en komen ze in een groter aantal. Het kweken op stro is wel lastiger dan het kweken op rogge.
Eerst moet je broed (spawn) klaarmaken. Dit broed zal vervolgens dienen om het stro mee te inoculeren. Rogge is de meest gebruikte bron voor broed. Begin met een pot rogge te inoculeren met sporen. Wanneer deze pot helemaal is gekoloniseerd wordt dit niet als substraat gebruikt. We zullen echter de inhoud van de pot gebruiken om in een zak met stro te verspreiden. Wanneer je dit doet, zal het mycelium zich verder ontwikkelen in rondom de stro. Wanneer je mycelium gebruikt om hiermee een ander substraat te inoculeren wordt dit ‘spawning’ genoemd. In dit voorbeeld zal het gekoloniseerde rogge dienen als spawn voor stro.
Voordat je met dit inoculeren begint moet de stro worden gesneden in stukken van maximaal 5 cm lang. Steriliseer of pasteuriseer de stro in een filterzak. Seal deze zak nog niet dicht, want je moet later het broed er nog aan toevoegen. Na afkoeling kan je het broed verdelen over de filterzak met stro. Het broed moet eerst wel losgeschud worden. Het is belangrijk dat het broed gelijk verdeeld wordt over al het stro, om te vermijden dat het substraat niet helemaal of ongelijk zal koloniseren. Vooral met een hele massa vochtige stro in een filterzak is het lastig om het mycelium er goed door te verspreiden. Het makkelijkst kan dit worden gedaan door lagen stro en mycelium af te wisselen. Voor een standaard filterzak is een pot met broed voldoende.
Laat ook nu de tijd weer haar werk doen, en na twee tot vier weken zal de stro helemaal gekoloniseerd zijn met mycelium.
Nu is de laatste fase aangebroken. Neem een grote, schone bak, verspreid de gekoloniseerde stro erin met daaroverheen een casinglaag. Sluit de bak goed af met plastic folie.
Plaats de bak weer in de incubatieruimte en geef het mycelium tijd om een sterk netwerk te vormen door de casinglaag heen. Na een paar dagen, wanneer het mycelium duidelijk zichtbaar is door de casinglaag heen, kan het in vruchtvormende omstandigheden worden neergezet. Na een week zullen de eerste paddestoelen opkomen.